تشخیص سیانوباکتریهای تولیدکننده‌ی میکروسیستین در تالاب انزلی با استفاده از روش PCR

سابقه و هدف: شکوفایی سیانوباکتری‌ها در آب‌های سطحی منجر به تولید سیانوتوکسین‌های خطرناکی مثل میکروسیستین می‌شود که مشکلات قابل توجهی ایجاد می‌کنند. در مطالعه‌ی حاضر، از یک آزمون PCR بهینه شده برای شناسایی سیانوباکتری‌های تولید‌کننده‌ی میکروسیستین موجود در تالاب انزلی استفاده شده است. مواد و روش‌ها: نمونه‌گیری آب از 20 ایستگاه واقع در نواحی شرقی، مرکزی و غربی تالاب انزلی صورت گرفت. استخراج DNA با استفاده از کیت DNG-Plus انجام گرفت. آزمون PCR برای پرایمرهای جهانی سیانوباکتری‌ها (23S30R و CYA106F) و پرایمر اختصاصی ژن کُدکننده‌ی میکروسیستین (mcyA-Cd1F و mcyA-Cd1R) بهینه شده و حساسیت و اختصاصیت آن ارزیابی گردید. سپس، آزمون PCR بهینه شده برای نمونه‌های تالاب انزلی به کار گرفته شد. فرایند کلونینگ محصولات PCR با توجه به رهنمودهای سازنده‌ی کیت انجام گرفت. یافته‌ها: مناسب‌ترین دما برای مرحله‌ی انیلینگ، واکنش 56 درجه سانتی‌گراد بود. بیشترین میزان تکثیر DNA زمانی در غلظت 4/0 میکرومولار پرایمرها مشاهده شد. به کارگیری آزمون PCR بهینه شده روی نمونه‌های تالاب انزلی آشکار کرد که همه‌ی ایستگاه‌‌های مورد مطالعه، آلوده به سیانوباکتری بودند که از بین آنها، سیانوباکتری‌های تولید کننده‌ی میکروسیستین در 10 ایستگاه حضور داشتند. محصولات PCR با موفقیت کلون شده و برای مطالعات آتی ذخیره گردید. نتیجه‌گیری: ممکن است تالاب انزلی در معرض خطر غلبه سیانوباکتری‌ها قرار گرفته باشد. از آزمون PCR بهینه شده در این مطالعه می‌توان به عنوان یک ابزار کارآمد به منظور مونیتورینگ و کنترل سیانوباکتری‌ها، به خصوص جهت شناسایی سویه‌های تولید کننده‌ی میکروسیستین در تالاب‌ها و یا سایر منابع آبی استفاده کرد.